BisulFlash DNA甲基化极速修饰试剂盒 -                         货号：A-P-1026
BisulFlash DNA Modification Kit

背景资料：BisulFlash DNA修饰试剂盒提供了最优化的缓冲液配方和试剂，利用EPI研制的新一代DNA亚硫酸氢盐转化技术，来对DNA进行修饰。利用本公司独创的化合物将DNA变性的同时进行亚硫酸氢盐转化操作。整个操作过程的时间被缩短到30分钟。并且，本试剂盒减少了90%的DNA损失，把样品中所有的胞嘧啶转换成尿嘧啶。传统方法在亚硫酸氢钠DNA转换步骤之前要单独的变性步骤，而BisulFlash技术中，DNA在整个亚硫酸氢钠转换过程中一直是维持在变性状态的。这个创造性的突破使本技术处理过程比其它试剂盒更加快速高效也更精确。我们在此基础上继续创新，鉴别了亚硫酸氢钠转换实验中关键性的四个组分，创造了新型的BisulFlash试剂盒。

产品描述:作为新一代的亚硫酸氢盐转换工具，BisulFlash DNA修饰试剂盒提供了最优化的缓冲液配方和试剂，能对DNA样品进行超快速的亚硫酸氢盐转换处理。利用试剂盒中即时可用的转换混合溶液，能在整个实验中一直维持DNA的变性状态。作为本公司的专利溶液，它能使亚硫酸氢钠快速地地所有胞嘧啶转换为尿嘧啶。混合溶液中含本公司特有的DNA保护剂，能阻止亚硫酸氢盐处理过程中DNA的化学和热降解。无毒的已修饰DNA俘获缓冲液能将DNA牢牢的结合在柱子的滤膜上，这样就能放心地洗涤DNA上的亚硫酸氢钠和盐离子。被修饰的DNA随后可以被洗脱下来，储存在-20℃两个月以上。该BisulFlash DNA甲基化修饰试剂盒内主要产品组份包括：BF1 (conversion mix solution) BF2 (capture solution) BF3 (desulfonation solution) BF4 (elution solution) BF5 (conversion enhancer) BF6 (denaturation enhancer) F-spin columns F-collection tubes 用户指南手册

产品特点：

1·快速的结果：只需要三十分钟，就能把您的DNA样品全部转换成纯化的亚硫酸氢盐修饰的DNA。这比时下其它同类试剂盒(2-8小时)或者原始方法(大于16小时)快得多。BisulFlash试剂盒中提供了所有亚硫酸氢盐转化实验和DNA洗涤所需的试剂，将时间减至最短步骤最少；

2·臻于完美的DNA转换效果：试剂盒每次转换反应可以转换0·2 ng – 1 ug 的 DNA。为了达到最优的转换效果，最好是限制在200-500 ng的范围。运用创新的方法和即时可用的专利DNA转换混合溶液使得转换反应可以在DNA变性的状态下进行，能将所有的胞嘧啶转换成尿嘧啶(>99·999%)，而5-甲基胞嘧啶则不受影响。实时PCR扩增被转换的DNA获得的低CT值证明了这种高效率(图·2)。完美的转换效率可以为随后的分析提供可靠和可重复的保障，是市场上其它同类试剂盒无法达到的。

3·强大的DNA保护：转换混合液中添加了DNA保护剂，可以阻止亚硫酸氢盐处理和变性过程中DNA的化学和热降解，使DNA一直处在稳定的变性状态，维持单链结构，为转换所有的胞嘧啶提供条件。阻止DNA降解使我们能够进行随后的扩增反应和分析大PCR片段。结合高效的DNA洗涤溶液和洗脱缓冲液，获得的转换DNA经长期储存(>6个月)和多次冻融不影响其质量。有效地避免了亚硫酸氢盐转化过程中90%的DNA被降解，从而获得更高更好的转化率。

4·极强的灵敏性：最低只需0.2ng或50个细胞的DNA样本即可实验甲基化。与我们的快速MS-qPCR试剂盒（A-P-1028）配套使用可以进行qMSP检测，实验结果更为精确可信，大大降低了实验过程中的假阳性概率。

5·简单、可信、实验条件始终如一。

效果评定：

DNA甲基化极速修饰试剂盒的原理        High accuracy of DNA conversion is achieved by the BisulFlash™ DNA甲基化极速修饰试剂盒. 50 ng of genomic DNA methylated in all CpG sites by DNA methylases was treated with the BisulFlash™ DNA甲基化极速修饰试剂盒. Converted DNA was amplified by real time qPCR using primers for multiple promoters containing numerous CpG sites and then directly sequenced

产品对比：

曲线分析： 

完整的胞嘧啶转化：使用DNA甲基化极速修饰试剂盒对来自3个癌细胞系提取好的200 ng基因组DNA进行处理。其次，在每次处理的未转化和转化的DNA样本要求使用未转化的特定DNA和转化的特定DNA带引物 (β-actin, 110 bps)另外，A: real time PCR; B: end-point PCR。 使用甲基化极速修饰试剂盒处理的DNA是完全被转化，要求对样本DNA处理后未转化DNA需要在45个循环后。

有效的DNA保护：使用DNA甲基化极速修饰试剂盒可以对0.2ng-200ng数量的人类全基因组DNA进行完全的甲基化转化处理。从 20 µl中取 1 µl 洗脱的DNA用来做实时荧光定量qPCR并用一对引物去扩增转化后的DNA。使用DNA甲基化极速修饰试剂盒可以对低至0.2ng的DNA进行亚硫酸盐处理。A: real time PCR; B: starting DNA amount-CT value curve.

参考文献：

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Zhang Y et. al. (January 2018). DNA methylation rather than single nucleotide polymorphisms regulates the production of an aberrant splice variant of IL6R in mastitic cows. Cell Stress Chaperones.

Kajal Nandi et. al. (January 2018). THE CLINICAL SIGNIFICANCE OF RASSF1A AND CDH1 HYPERMETHYLATION IN BREAST CANCER PATIENTS International Journal of Scientific Research. 7(1)

保存建议：在接收到艾德寄出的试剂盒后请按照说明书建议，使用不同的保存条件或温度来保存试剂盒内组分

定购信息：

产品名称	规格	操作手册	货号	询价
BisulFlash DNA甲基化极速修饰试剂盒	50   次	英文PDF--中文PDF	A-P-1026-50
BisulFlash DNA甲基化极速修饰试剂盒	100 次(2*50次)	英文PDF--中文PDF	A-P-1026-100
BisulFlash DNA甲基化极速修饰试剂盒	200 次(4*50次)	英文PDF--中文PDF	A-P-1026-200

表观遗传学产品全面解决方案列下：

产品名称	规格	操作手册	货号	询价
DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法)	48 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1036-48
DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法)	96 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1036-96
DNA羟甲基化定量试剂盒(荧光法)	48 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1037-48
DNA羟甲基化定量试剂盒(荧光法)	96 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1037-96
DNA甲基化定量试剂盒(荧光法)	48 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1035-48
DNA甲基化定量试剂盒(荧光法)	96 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1035-96
DNA甲基化定量试剂盒(比色法)	48 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1034-48
DNA甲基化定量试剂盒(比色法)	96 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1034-96
通用DNA甲基化定量试剂盒	48 次	PDF	A-P-1011-48
通用DNA甲基化定量试剂盒	96 次	PDF	A-P-1011-96
超敏DNA甲基化定量试剂盒	48 次	PDF	A-P-1021-48
超敏DNA甲基化定量试剂盒	96 次	PDF	A-P-1021-96
总DNA甲基化定量试剂盒	48 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1014B-48
总DNA甲基化定量试剂盒	96 次	英文PDF--中文PDF	A-P-1014B-96

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关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的，由胞嘧啶修饰而来。5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同。尽管到现在为止还不确知其功能，有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用。5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA甲基信息，也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异。在EPI公司的MethylFlash技术之前，我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC,以及区分5-hmC和5-mC

5-hmC 和 5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序，这些技术都不适合用来检测5-hmC，因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来。为了解决这个问题，EPIk研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)。本试剂盒提供了一种很经济的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶，并且区分5-hmC, 5-mC, 和 C，使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息，也能够在新样品中寻找DNA羟甲基化。