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技术服务>分子生物学 |
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miRNA Real-time qPCR
Real-time miRNA是小的非编码RNAs,通过选择性的与互补的mRNA或3' UTL序列结合控制着转录水平的基因表达。近30%哺乳动物基因受小RNA分子的调控,从而调节各种生物功能,包括发育、细胞分化、增殖、凋亡、维持stemness和impriting。Northern blot是分析各种miRNAs常用的方法,但Northern blot分析的灵敏度低、通量差仍是其主要不足。实时定量PCR由于其灵敏度高、方便快速成为检测的一个不错选择。
由于成熟的miRNA仅为21-25bp,不能通过传统方法进行发转录,进而进行定量。艾德科技采用miRNA加尾方法反转录miRNA,然后进行miRNA定量(见下图)。
服务要求
需提供新鲜或者保存完好的细胞(至少5×106)、组织(100mg)、血液(300μl)等样本材料;或纯化好的总RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好);同时提供待测miRNA序列或登录号。
服务报告内容
miRNA(或总RNA)浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,Ct值以及数据统计分析(可选),实验报告以及剩余引物和模板(信诺金达可保存1个月)
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服务编号 |
服务项目 |
内容说明 |
价格 |
周期 |
ATS-M00 |
miRNA SYBR Green I 相对定量 |
基础费用 |
引物合成,扩增效率 |
¥1500/miRNA |
4-5周※ |
ATS-M01 |
样品检测费用 |
检测样品数<10 |
¥300/样品•基因 |
ATS-M02 |
检测样品数≥10 |
¥200/样品•基因 |
ATS-M03 |
miRNA 提取和逆转录 |
新鲜组织、血液、细胞miRNA提取 |
¥1200/样品 |
1-2周 |
※:一般情况下,3周左右可完成实验!若遇特殊原因,比如实验材料降解,需要重新提供样品或者总RNA需要重新提取;基因表达量较低,需要构建标准品等情况,周期会有所延长。
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