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  EpiTech探针法甲基化定量PCR试剂盒(A-59436)
   

EpiTechTM探针法甲基化定量PCR试剂盒                                              货号:A-59436

EpiTect MethyLight PCR Kits

背景资料:EpiTect MethyLight PCR Kit和EpiTect MethyLight PCR + ROX Vial确保灵敏、可靠地进行所有基于TaqMan探针或双标记探针的甲基化位点的定量分析。试剂盒以即用型形式提供,无需优化,与一系列real-time PCR仪兼容。EpiTect MethyLight PCR Kit 可用于除了Applied Biosystems 7500以外的所有Applied Biosystems提供的PCR仪。EpiTect MethyLight PCR +ROX Vial Kit 适用于其他所有PCR仪,包括Applied Biosystems 7500 和Bio-Rad、Cepheid、Corbett、Eppendorf、Roche和Stratagene等公司提供的仪器。

产品描述:半定量real-time PCR过程中,TaqMan探针可配合甲基化特异性引物使用

TaqMan探针位于甲基化特异性引物中,未甲基化CpG位点与甲基化CpG位点的亚硫酸氢盐转化后DNA需要不同的引物,因此需要量种不同的引物对,一个针对甲基化的转化后DNA,另一个针对未甲基化的转化后DNA。如果甲基化特异性引物结合到DNA上,它会在延伸阶段加长,并且Taq DNA Ploymerase的5'→3' 外切酶活性会引起引物降解,释放荧光团。由于荧光团与淬灭团已经隔离,可检测到荧光。

定量MethyLight real-time PCR中的甲基化特异性TaqMan探针

双标记探针,包括TaqMan探针,使序列特异性的寡核苷酸,带有一个荧光团和一个淬灭团。荧光团在探针的5' 末端,而淬灭团通常在3' 末端或中间。在PCR的延伸阶段,Taq DNA polymerase 的5'→3' 外切酶活性水解探针,将荧光团和淬灭团分离开。可检测的荧光量与扩增的PCR产物成正比。

高灵敏度

EpiTect MethyLight Master Mix专用于序列特异性探针法高灵敏地检测甲基化和未甲基化DNA。除各种盐类和添加剂,缓冲液含有经优化的KCl 和 (NH4)2SO4组合,提高每个PCR扩增退火过程特异性引物与探针结合的比例,确保检测未甲基化和/或甲基化靶序列可区别的杂交。与可靠的探针法检测甲基化状态相结合,严谨的引物退火条件可在亚硫酸氢盐转化后DNA扩增过程中提高PCR特异性。

简便性

EpiTect MethyLight PCR Kit以预混液的形式供应,确保快速方便的反应构建。提供两种规格的试剂盒,预混液中添加和未添加ROX,针对各种不同的real-time PCR仪可灵活选择。经验证的操作流程适用于大部分real-time PCR仪,确保最佳效果。

MethyLight PCR的对照反应 

为确保用于检测甲基化或未甲基化DNA的PCR探针和引物具有特异性,需要进行对照反应。应当应用不同浓度的亚硫酸氢盐转化后对照DNA(完全甲基化和完全未甲基化)。此外,确定甲基化程度过程中应当将这些对照DNA混合物作为定量分析标准。因此需要甲基化的亚硫酸氢盐转化后DNA,未甲基化的亚硫酸氢盐转化后DNA和基因组DNA。QIAGEN以即用型试剂盒的形式提供所有的对照DNA,用于可靠的、标准化的甲基化特异性对照反应。

产品特点:

1·高精确度、高灵敏度的探针法MethyLight定量PCR分析  ;

2·灵使用MethyLight assays的探针-引物混合物,可靠进行甲基化定量;

3·方便的预混液形式,无需进一步优化;

保存建议:在接收到艾德寄出的试剂盒后请按照说明书建议,使用不同的保存条件或温度来保存试剂盒内组分

定购信息:

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EpiTechTM探针法甲基化定量PCR试剂盒 200 次 PDF A-59436 点击这里给我发消息
EpiTechTM探针法甲基化定量PCR+ROX Vial试剂盒 200 次 PDF A-59496  

表观遗传学产品全面解决方案列下:

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DNA羟甲基化定量试剂盒(荧光法) 48 次 PDF A-P-1037-48 点击这里给我发消息
DNA羟甲基化定量试剂盒(荧光法) 96 次 PDF A-P-1037-96  
DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法) 48 次 PDF A-P-1036-48 点击这里给我发消息
DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法) 96 次 PDF A-P-1036-96  
DNA甲基化定量试剂盒(荧光法) 48 次 PDF A-P-1035-48 点击这里给我发消息
DNA甲基化定量试剂盒(荧光法) 96 次 PDF A-P-1035-96  
DNA甲基化定量试剂盒(比色法) 48 次 PDF A-P-1034-48 点击这里给我发消息
DNA甲基化定量试剂盒(比色法) 96 次 PDF A-P-1034-96  
通用DNA甲基化试剂盒(定性分析) 48 次 PDF A-P-1011-48 点击这里给我发消息
通用DNA甲基化试剂盒(定性分析) 96 次 PDF A-P-1011-96  
超敏DNA甲基化定量试剂盒 48 次 PDF A-P-1021-48 点击这里给我发消息
超敏DNA甲基化定量试剂盒 96 次 PDF A-P-1021-96  
总DNA甲基化定量试剂盒 48 次 PDF A-P-1014-48 点击这里给我发消息
总DNA甲基化定量试剂盒 96 次 PDF A-P-1014-96  

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关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的,由胞嘧啶修饰而来。5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同。尽管到现在为止还不确知其功能,有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用。5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA甲基信息,也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异。在EPI公司的MethylFlash技术之前,我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC,以及区分5-hmC和5-mC

5-hmC 和 5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序,这些技术都不适合用来检测5-hmC,因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来。为了解决这个问题,EPIk研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)。本试剂盒提供了一种很经济的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶,并且区分5-hmC, 5-mC, 和 C,使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息,也能够在新样品中寻找DNA羟甲基化。

 
 
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