| 二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，上面通常连有酶、荧光素或生物素等耦联标记。二抗针对某一特定物种（如小鼠）的所有抗体（如IgG、IgM或IgA等）均具有反应性，因而使用标记的二抗可以免去对每个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏度。通常情况下，某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择，如何能选择到最适合该实验的二抗，需要综合以下几个方面进行考虑：
1. 选择全IgG形式还是F(ab’)2片段，或者Fab片段二抗
全IgG形式的二抗是从抗血清中分离出来的完整的分子；这些抗体有一个Fc部分和两个与抗原结合的Fab部分，因此是二价的，也是性价比最高的。 F(ab’)2片段形式的二抗是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分，剩下两个靠二硫键连接的结合抗原的Fab部分，依然是二价的；该抗体可避免与Protein A /G或与Fc受体的结合， 还由于其分子本身比较好，更容易渗透入细胞组织结构内而灵敏度更高 。Fab片段形式的二抗是用木瓜蛋白酶消化IgG后得到的；Fab片段抗体由于只含有一个结合位点，可用来封闭内源性的免疫球蛋白。
2. 根据一抗的种属来源和类型选择二抗
二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果一抗是小鼠源的抗体，二抗则选抗小鼠的二抗；如果一抗是从兔血清里制备的兔源抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。另外，二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。艾德科技能为您提供最全种属的二抗产品。
3. 根据实验要求的特异性进一步筛选二抗
Anti-IgG (H+L)是最常用也是性价比最高的二抗形式，这类抗体和IgG分子的重链和轻链都可以反应，也可以和其他的免疫球蛋白家族（IgM，IgA，IgD,IgE）和亚家族反应，因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链。 Anti-IgG，Fc fragment specific这类抗体和IgG重链的Fc部分反应，与F(ab’)2或Fab无交叉反应，但可能与IgM或IgA有交叉反应；而抗IgG，Fcγ fragment specific则只与IgG重链反应，通常不能和IgA或IgM任何表位反应。 Anti-IgG，F(ab’)2 fragment specific则与Anti-IgG，Fc fragment specific则正好相反。
另外，与一个物种反应的二抗可能与其他物种发生交叉反应，除非这类抗体经过其他物种的血清蛋白吸附实验。如Jackson 的Horseradish Peroxidase-conjugated AffiniPure Mouse Anti-Goat IgG (H+L) (min X Ms, Hu, Rb Sr Prot) 小鼠抗山羊二抗，就是经过了小鼠、人、兔血清的吸附， 其与小鼠、人、兔血清内蛋白（包括免疫球蛋白）的交叉反应降到最低。 当其他物种免疫球蛋白的出现可能导致交叉反应时，推荐使用这类抗体。
作为多家知名品牌的中国代理或区域代理，艾德科技向您推荐并提供最高品质和最多用途的各种标记的二抗产品，包括HRP及AP酶标二抗、 FITC/Rhodamine /Cy系列/DyLight系列等荧光二抗等均为原装进口包装，高效敏感，能为您提供最值得信赖的抗体产品保障和售后服务。 |
