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表观遗传学

表观遗传学是指可遗传的由非DNA序列改变引起的基因表达的变化。引起表观遗传的主要机制有DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA等。研究表观遗传学机制对于癌症研究、分子标记物鉴定、影响因子定位和潜在药物靶点日益重要。

DNA甲基化研究试剂

DNA甲基化(DNA methylation)是最早发现的修饰途径之一，大量研究表明，DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。在 DNA甲基化转移酶(DNA Methyl Transferases)的催化下，利用S-腺苷蛋氨酸提供的甲基，将胞嘧啶第5位碳原子甲基化，从而使胞嘧啶转化为5甲基胞嘧啶(5-Methylcytosine，5-mC)。最新研究表明，Tet家族蛋白能催化5甲基胞嘧啶转换为5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine，5-hmC)。有趣的是，来自北卡罗来纳大学医学院生物化学和生物物理学教授张毅(音译)教授实验室发现Tet蛋白能进一步氧化5-hmC产生5-胞嘧啶甲酰(5-formylcytosine，5-fC)和5-胞嘧啶羧基(5-carboxylcytosine,5-caC), 继而会被胸腺嘧啶DNA糖基化酶(DNA glycosylase,TDG)识别并消化。

5-methylcytosine,5-mC	5-hydroxymethylcytosine,5-hmC	5-Formylcytosine,5-fC	5-Carboxylcytosine,5-caC
四种不同修饰的胞嘧啶

重亚硫酸盐甲基化DNA分析处理试剂盒

检测DNA甲基化的方法有很多种，在众多方法中，研究人员常常会使用到一项技术，那就是重亚硫酸氢盐转化。DNA经过重亚硫酸盐(Bisulfite)处理后，甲基化的胞嘧啶不发生变化，而未甲基化的胞嘧啶变为尿嘧啶。随后用测序、定量PCR和芯片等分析来比较处理和未处理DNA的序列，就能确定哪些碱基是甲基化的。目前市场上有多个厂家提供亚硫酸氢盐转化试剂盒，试剂盒中的试剂和操作步骤经过优化，容易得到更加一致的结果。

甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MSP)试剂盒

甲基化特异性的PCR是一种灵敏度高且操作相对简单的甲基化研究方法。重亚硫酸盐处理DNA后，基因组DNA发生的由甲基化状态决定的序列改变，随后进行引物特异性的PCR。该方法引物设计是关键。MSP中设计两对引物，即一对结合处理后的甲基化DNA链(引物对M)，另一对结合处理后的非甲基化DNA链(引物对U)。检测MSP扩增产物，如果用引物M能扩增出片段，则说明检测位点存在甲基化；若用引物U扩增出片段，则说明被检测的位点不存在甲基化。Millipore公司的CpG WIZ ?甲基化特异性PCR试剂盒，提供了目的基因的甲基化和非甲基化引物以及被验证的PCR条件，同时提供对照DNA。

甲基化DNA分离纯化试剂盒

DNA甲基转移酶（DNMT）活性/抑制剂分析试剂盒

以高灵敏度的ELISA为基础，利用甲基化CpG結合域(MBD)对甲基化DNA的高亲和力，以富含CpG的DNA底物(substrate)检测DNA甲基化转移酶的活性。96孔板设计，适用于高、低通量的实验。

DNA甲基转移酶（DNMT）活性/抑制剂分析试剂盒检测原理

DNA甲基化相关抗体

其他相关产品

组蛋白/染色质研究试剂

在表观遗传学的研究内容中, “组蛋白密码”是其重要部分。核心组蛋白上的共价修饰,在真核细胞的染色质结构重塑和基因表达调控方面起重要作用。

核蛋白提取试剂盒

Nuclear Extract Kit是一种从哺乳动物组织或细胞中制备细胞核、细胞质或全细胞提取物的试剂盒。其高品质的提取物，可用于TransAM™ Kits、Gel-shift、Western blot、DNA足印法(Footprinting)或作为转录因子纯化的样品制备。Nuclear Extract Kit不需进行试剂优化,能保证获得高回收率的抽取蛋白。其详细的操作步骤能确保抽提物不受来自其他细胞成分的蛋白污染。

组蛋白纯化试剂

Active Motif的组蛋白纯化试剂让您可以轻松的从任何细胞系或组织样品中分离纯化核心组蛋白，同时仍保留转录后修饰如乙酰化，甲基化和磷酸化等。由组蛋白纯化试剂盒纯化所得的高纯度组蛋白可适用于多种下游实验应用与功能研究。

ChIP实验的一般过程

染色质免疫共沉淀试剂盒

染色质免疫沉淀（ChIP）是研究蛋白质-DNA相互作用的一项强大技术，广泛用于多个领域的染色质相关蛋白的研究（如组蛋白及其异构体，转录因子等），特别适用于已知启动子序列或整个基因位点的组蛋白修饰分析研究。这项技术采用特定抗体来富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段，通过多种下游检测技术（定量PCR，芯片，测序等）来检测此富集片段的DNA序列。

转录因子活性分析试剂盒检测原理

转录因子活性分析试剂盒

转录因子为DNA结合蛋白，严格控制基因的表达。转录因子一般由两个不同的结构域组成，一个结构域与特定DNA序列有高的亲和力，另一个结构域具转录活性。磷酸化特定氨基酸残基或加工结合的抑制性蛋白，可以激活转录因子。研究和定量分析转录因子活性对于研究细胞分化、免疫应答、炎症反应和多种疾病状态等细胞功能至关重要。

蛋白修饰及检测试剂盒

许多蛋白的功能和活化都受到翻译后修饰的调控,一些功能基团的增减可导致蛋白构象的改变,从而使其能够与其他蛋白结合。磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化以及SUMO化参与调节蛋白的活性以及信号转导.

组蛋白及相关抗体

组蛋白及组蛋白修饰相关抗体,全面提供,详细产品信息可与欣博盛公司联系。

EpiShear™多样品超声破碎仪(Multi-Sample Sonicator)

特点：
1.一次可处理8份样品(20 µl - 1.2 ml sample per vial)
2.可用于ChIP和DNA甲基化研究中染色质或DNA的断裂
3.也可用于细胞破碎，RNA剪切或其他匀浆处理
4.可搭配冷却器Chiller一起订购

其他相关产品

EPIGENETICS LIBRARY

表观遗传化合物库包含多种小分子化合物，具有已知的调节表观遗传修饰相关分子的活性，如HDACS,SIRTS, Lysine demethylases, HATs, Histone methyltransferases, DNA methyltransferases等。每种化合物以10mM的浓度溶于DMSO，以96孔板形式提供。该化合物库是研究化学基因组学，药物研发及其他药理学应用的一种非常有用的工具。

端粒酶活性检测

端粒是真核细胞染色体末端的一段特殊序列，由上千个6碱基重复序列(TTAGGG)组成。在体细胞中，随着细胞的分裂，端粒长度会变短。端粒酶是基本的核蛋白逆转录酶，在细胞染色体复制过程中，能够以自身RNA为模板，在染色体3’末端合成重复序列，维持端粒的长度。端粒酶的活性端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，但是在一些“不死细胞”如肿瘤细胞、生殖细胞中则具有很高的活性，补偿DNA复制导致的端粒缩短从而维持端粒长度的稳定。因此可以假设端粒长度可能起到“有丝分裂钟”的作用，来可作为测量细胞分裂的次数的标志，最终作为细胞衰老和凋亡的信号。因此，检测细胞中端粒酶的活性对干细胞、肿瘤生物学的研究具有很重要的意义，已有研究表明，在20多种肿瘤细胞中，80%以上可以检测到高端粒酶活性。

* *利用端粒酶在体外可以以其自身RNA的模板区为模板，在适宜的寡核苷酸链的末端添加6个碱基的重复序列的原理，1994年Kim建立了基于PCR基础上的端粒重复序列扩增法（telomeric repeat amplification protocol, TRAP）。TRAP主要原理如下：首先合成一个18nt的TS做上游引物，端粒酶结合TS末端的GTT并合成AGGGTTAG，然后每经过一次转位合成一个ggttag的6碱基重复序列，端粒酶灭活后，加入一个24nt的CX做下游引物，经过多次变性-退火-延伸，扩增端粒酶延伸产物。然后对PCR产物使用不同的方法进行检测，从而达到检测端粒酶活性的目的.

Millipore公司的TRAPeze®系列端粒酶检测试剂盒采用了一种缓冲液、两种酶的 PCR 系统，能高灵敏地在体外检测哺乳动物细胞的端粒酶活性，适用于细胞和组织提取物。该系列产品基于TRAP的原理，结合不同的PCR产物检测方法，方便研究者根据自己的需求选择合适的产品：

TRAPeze® Telomerase Detection Kit：将PCR产物进行非变性凝胶电泳，然后使用荧光染料SYBR® Green对凝胶进行染色。操作简单、需要时间短，但不能进行定量检测。

TRAPeze® XL Telomerase Detection Kit：在TRAPeze® Telomerase Detection Kit的基础上，加入了创新的Amplifluor® 荧光能量转移标记引物，可通过直接在PCR管中测定荧光强度来定量检测端粒酶活性，无需跑胶和ELISA等后续操作，非常简单方便。因为不需要打开PCR管盖，最大程度避免了污染的可能性，将假阳性降到最低。(跑胶后无需加荧光染料就能看到条带)

TRAPeze® RT Telomerase Detection Kit：Realtime-PCR方法定量检测。

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