超级MeDIP试剂盒(超级DNA甲基化免疫沉淀试剂盒) 货号:A-P-1052
EpiQuik MeDIP Ultra Kit
背景资料:基因组DNA的表观遗传变化的核心机制是CpG岛在特定基因的过度甲基化和总体DNA超甲基化。特定区域的DNA甲基化在基因转录表达中扮演着非常重要的作用并且在启动子的5'-CG-3'二核苷酸和基因的第一个外显子上发现。总体DNA的超甲基化通常是由各种外部环境的影响造成的。这种甲基化的变化,通常伴随许多的疾病,尤其是癌症。
高度特异提取的甲基化DNA结合NGS(二代测序)针对更为广泛的甲基化分析提供了更为便利和可行的甲基化数据,包括正常和疾病细胞的,比如:癌症细胞。【3】这种分析的需求更好的提取甲基化的DNA来获取较少的背景为了完成更高的特异性(>98%)来识别真实存在的甲基化区域。全基因组甲基化数据的富集最主要的方法是通过甲基化DNA免疫沉淀(MeDIP)来富集甲基化的DNA。【4】然而,目前采用MeDIP方法,由大多数商业化的试剂盒取代,这些产品有着显而易见的劣势比如:包含高的非特异性的富集(富集DNA的数量是>75% 的DNA输入量)。【5】耗时,费力和低通量。为此,高效和特异性的捕获甲基化的 DNA对于二代测序分析非常重要,一款理想的MeDIP方法:采用最小的背景水平拥有高灵敏度的试剂盒应用而生。A&D Technology Corporation的超级MeDIP试剂盒的研发解决了这些不足。并且拥有最大限度的灵敏度和最小的非特异性的背景信号.
产品描述:超级MeDIP试剂盒包括了所有必须的试剂,来进行成功的MeDIP步骤,使用从哺乳动物细胞或组织样本提取的DNA。这款试剂盒包括了甲基化的DNA(mDNA)对照和未甲基化的DNA(unDNA)对照,一个阴性对照non-immune IgG和对照引物,使用对照DNA来证明甲基化DNA富集的效率和特异性。阳性对照DNA包含5-mC只能通过5-mC抗体免疫沉淀而不被non-immune IgG免疫。在这个MeDIP中,免疫沉淀反应得到富集的5-mC DNA片段是在微孔板中处理在最佳的反应条件下,以高效率在3个小时内完成MeDIP成为可能。然后免疫沉淀反应得到的甲基化DNA清洗,释放,和洗脱。洗脱的DNA可以被用来进行各种下游实验程序包括PCR(MeDIP-PCR)和芯片分析(MeDIP-chip),和尤其是适合MeDIP-Seq.
产品特点:
1·极速:整个操作步骤仅需不到3小时(从样本输入到制备好的甲基化DNA)。非常快速且方便的操作,而且包含了不到20分钟的最少的处理时间;
2·专一性:最佳的溶液和操作说明容许最小的背景克服了因非特异富集的劣势;
3.特异性:试剂盒中高特异性的5-mC单克隆抗体可强的结合2或更多的5-mCs的单链和双链的DNA片段,高灵敏度的富集甲基化的DNA特异性可达>99%;
4.纯化功能:离心柱和收集管方便了DNA纯化步骤;
5.超灵敏:要求非常低的DNA输入量,每次反应少至50ng(10,000个细胞);
6.灵活性:96孔可拆卸板模式使研究人员能根据自己需要选择手工单个单管或是高通量模式操作;
7.稳定性:使用预先设置好的MeDIP条件,高度可再现;
8.应用广:与各种下游实验分析相兼容。包括、MeDIP-PCR和MeDIP-chip和特异性的 MeDIP-Seq。
参考文献:
1.Hum. Reprod. (2015) doi: 10.1093/humrep/dev228 First published online: September 18, 2015 点此链接
2.Mol. Hum. Reprod. (2016) doi: 10.1093/molehr/gaw028 First published online: April 18, 2016 点此链接
保存建议:在接收到艾德寄出的试剂盒后请按照说明书建议,使用不同的保存条件或温度来保存试剂盒内组分。
定购信息:
产品名称 |
规格 |
操作手册 |
货号 |
询价 |
超级MeDIP试剂盒(超级DNA甲基化免疫沉淀试剂盒) |
24 次 |
英文PDF-中文PDF |
A-P-1052-24 |
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超级MeDIP试剂盒(超级DNA甲基化免疫沉淀试剂盒) |
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A-P-1052-48 |
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