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在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。

如何选择合适的GAPDH抗体？

内参抗体虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于GAPDH的检测分子量大约在36kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高，不适合做内参。

因为检测的目的蛋白分子量在50kD左右，之前的β-Tubulin不是很适合，就购买了一支Abbkine的GAPDH抗体做内参，效价确实有点惊讶，我用1:1000倍起始稀释觉得条带很浓，后来一直到1:8000稀释，同时减少了曝光时间，条带仍然很清晰。——武汉大学生命科学院一客户

 

另外，我们还需要考虑自己的需要，特别是实验应用上的需要。一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl GAPDH抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的GAPDH抗体（假如 WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。

为什么选择推荐Abbkine品牌的GAPDH抗体？

供应GAPDH抗体的进口品牌有很多，像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling（CST）、Millipore等都有相关GAPDH抗体提供。但是由于不是专门的标签和内参抗体供应商，因此在性价比上不是最优的选择， 以Abcam为例，其一支100μl GAPDH抗体的RMB报价为￥4418；CST的一支100μl GAPDH抗体的报价是￥2997。

另外，一些国内的供货商也能提供分装的GAPDH抗体，但是在品牌和质量保障上都有不足。国产分装的GAPDH体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的GAPDH抗体有些具有较好的检测活性，但是在应用类型上有差距，并且在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。如果您想买到一支性价比更高，同时也是原装进口品牌的GAPDH内参抗体，那 Abbkine可能会是您的一个重要考虑选项之一。我们向您推荐Abbkine的GAPHD单克隆内参抗体Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)（货 号A01020）。

该抗体单克隆抗体，克隆号为2B5。其抗原为KLH偶联的GAPDH部分多肽序列，其检测种属非常的广泛，可识别人、小鼠、兔、大鼠、猴、狗、鸡、猪和绵羊等其它哺乳动物的GAPDH蛋白，也算是一个真正保守的内参抗体。另外，该抗体的效价非常高，WB实验推荐稀释比率为 1:1000-1:10000，甚至有客户报告更高的稀释比率。

该β-Tubulin内参抗体免疫荧光的效果也非常棒，是一款非常适合做免疫荧光对细胞骨架进行染色定位的抗体产品。另外，也有客户报告使用该抗体用于组织染色，也取得了意外的效果。

Abbkine还提供大包装1ml的GAPDH内参抗体，非常适合经常进行内参验证或校准，或者进行细胞骨架荧 光定位的免疫学实验需求。为方便客户 的使用， 上述产品，Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场，提供全球化的产品质量追踪和售后服务以及保障，如果您在使用过程中有任何问题， 请直接与其当地代理商艾德科技（北京）有限公司联系。

美国Abbkine品牌是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌，艾德科技将其引入中国，作为其中国区域代理，将为客户提供最具性 价比的常规免疫学试剂，如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗，抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或 区域代理，艾德科技能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣，请致电全国电话010-57225208  或者010-52406250 到艾德科技（北京）有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。