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Epigenetics |
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| Epigenetics>【SimGen】 |
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病毒RNA纯化试剂盒
·20-40分钟内即可完成体液中总核酸的制备。
·补加的Carrier RNA有效提高病毒的检测敏感性（稳定检测到500 copies/ml RNA病毒，最高达到100 copies/ml RNA病毒）。
·无须酚氯仿抽提及异丙醇沉淀步骤。
适用于从不含细胞的体液标本中纯化病毒RNA。
· 20- 40分钟内即可完成体液中总核酸的制备。
· 补加的Carrier RNA有效提高病毒的检测敏感性（稳定检测到500 copies/ml RNA病毒，最高达到100 copies/ml RNA病毒）。
· 无须酚氯仿抽提及异丙醇沉淀步骤。
· 适合从不含细胞的体液样品（包括血浆、血清、尿液、 CSF及细胞培养上清）纯化病毒RNA。
· 起始样品体积：100 μl体液。
· 所获的核酸不含杂质及抑制物，可使用多至1/2反应体系体积的模板进行扩增。
· 最高可达90% 的病毒RNA回收效率。
曲线1：用simgen病毒RNA纯化试剂盒从100 μl 5×105copies/ml的HCV血清中提取的RNA作为模板检测HCV所获得的扩增曲线（RT-PCR一步法，50 μl扩增体系中加入25 μl纯化的RNA）。
曲线2：用传统的Trizol法（添加糖原助沉）从100μl同一 5×105copies/ml的HCV血清中提取的RNA作为模板检测HCV所获得的扩增曲线（RT-PCR一步法，50 μl扩增体系中加入全部纯化的RNA）。
产品原理
体液样品经裂解液溶解变性后，用柱纯化核酸技术过滤除去变性的蛋白及杂质，吸附在纯化柱上的核酸经Buffer WA和Buffer WB洗涤后，可彻底清除残留在纯化柱上的杂质及PCR抑制物。纯化柱上的核酸可直接用Buffer TE或水洗脱，并可直接用于各种分子生物学实验。
操作步骤
在体液样品中加入含Carrier RNA的Buffer L溶解病毒，再加入乙醇调整裂解液的柱结合条件。病毒核酸在纯化柱上经过结合、清洗步骤去除残留的杂质后，即可被TE溶液洗脱下来。
可适用的分子生物学实验
RT-PCR
产品序号：4001050
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规格 |
操作手册 |
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关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的，由胞嘧啶修饰而来。5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同。尽管到现在为止还不确知其功能，有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用。5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA甲基信息，也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异。在EPI公司的MethylFlash技术之前，我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC,以及区分5-hmC和5-mC
5-hmC 和 5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序，这些技术都不适合用来检测5-hmC，因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来。为了解决这个问题，EPIk研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)。本试剂盒提供了一种很经济的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶，并且区分5-hmC, 5-mC, 和 C，使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息，也能够在新样品中寻找DNA羟甲基化。
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