一、亲和素与链霉亲和素概述
亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。亲和素主要包括卵白亲和素、链亲和素、卵黄亲和素及类亲和素等。后两种因其特异性亲和力低，研究不多，前两种目前已深入研究并得到广泛应用。
亲和素又称卵白素或抗生物素，分子量为68000，pI 10～10.5；在pH9～13缓冲液中性质均稳定，耐热并耐多种蛋白水解酶的作用。天然亲和素为碱性蛋白，由4个相同的亚单位构成4聚体；每个亲和素亚单位通过其结构中的色氨酸残基与生物素中的Ureido环（I环）结合。因此，1个亲和素分子存在4个与生物素分子结合位点，其结合常数（Ka）高 达1015mol/L。通常，亲和素的活性单位是以亲和素结合生物素的量来表示的，即以能结合1ug生物素所需要的亲和素量为1个亲和素活性单位。一般1ug亲和素约含13～15个活性单位。
链霉亲和素（streptavidin，SA）是从链霉菌streptomyces avidinii培养物中提取的一种分泌性蛋白质，分子量为65kDa，等电点6.0。链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨酸的含量较大，而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；链霉亲和素是一种稍偏酸性（pH6.0）的蛋白质，不带任何糖基。
链霉亲和素的活性单位是以结合1μg生物素所需的量来表示，1mg链霉亲和素的最高活性可达18U。
链霉亲和素是四聚体蛋白，一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合。链霉亲和素与生物素之间的亲和力极为强烈，亲和常数（K）为1015mol/L。链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10mol/L数量级。因此链霉亲和素是一种非常完美的生物素结合蛋白，链霉亲和素的适用范围也比亲和素更为广泛。
SA与A的ka虽然相同，但在实际应用中其检测灵敏度明显优于A，其原因是SA为略偏酸性的蛋白。SA的每条肽链含159个氨基酸残基，其中赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的含量比一般亲合素少，反之含酸性氨基酸较多，其等点为6.0，较A（pI=10）为低，同时在结构中SA不含任何糖基，而A含糖可高达10%。A的高pI及高含糖结构导致在聚苯乙烯板和硝酸纤维素膜上或与组织细胞DNA结合时，易产生一定程度的非特异性结合，造成较高的显色背景，而SA较A在应用中明显克服了这一缺点。
SA最高的活性可达18u，较A高（15u）；与A一样，每个SA分子也具有4个可与生物素分子结合位点，故其效应相同。
二、链霉亲和素与亲和素的比较
1、相同点
（1）与生物素的结合能力：亲和素（AV）为13-15U，链霉亲和素（SA）为14-18U。
（2）活性中心依赖于色氨酸-赖氨酸：亲和素在氨基酸序列的70-71和110-111两个位点有色氨酸-赖氨酸，链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和120-121两个位点含有色氨酸-赖氨酸。
2、不同点
（1）分子量：亲和素为68KDa，链霉亲和素为65KDa。
（2）等电点：亲和素为10.5，链霉亲和素为6.0。亲和素带正电较多，非特异性结合较强。
（3）位阻效应：链霉亲和素的生物素结合位点较亲和素深，位阻效应较强，长臂生物素更适合。
（4）生物素的结合：亲和素随机结合，链霉亲和素协同结合。
（5）蛋白质结构：亲和素含二硫键和10%糖，链霉亲和素含甘氨酸丙氨酸较多，无糖和二硫键。
三、链霉亲和素相关产品
1、标记化链霉亲和素
用
酶或荧光素等修饰链霉亲和素，应用于ELISA放大检测信号，提高检测灵敏度。
（1）异硫氰酸荧光素（FITC）标记链霉亲和素
荧光素是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞、病理等方面的免疫标记试剂。将异硫氰酸荧光素（FITC）共价交联到链霉亲和素分子的氨基基团上，经过纯化、蛋白定量、FITC浓度及效价鉴定制备而成。
（2）辣根过氧化物酶标记链霉亲和素
2、链霉亲和素
酶标板
将链霉亲和素直接或间接预包被在酶标板上，稳定性高，易于保存，使用时只要加入生物素化的抗体或者抗原即可。
3、
链霉亲和素磁珠
链霉亲和素磁珠由磁微粒与高纯度链霉亲和素共价结合而成。磁珠可用于捕获生物素标记的底物，包括生物素标记的抗原、抗体和核酸。生物素-链霉亲和素的相互作用很强，非特异性结合率很低，使得被捕获的底物可满足后续实验要求。
链霉亲和素磁珠逐渐取代链霉亲和素
酶标板成为链霉亲和素在
分子诊断、细胞筛选等应用领域的首选方案。生产
链霉亲和素磁珠的厂家很多，就笔者用过的较好的进口产品有Dynal、GE、Promega等国际品牌，但价格昂贵，值得一提的是国内的PuriMag 的
链霉亲和素磁珠，在生物素结合量、背景噪音、稳定性和磁响应性等方面均可全面与国际品牌相媲美，对于注重性价比的企业和研究单位，是制得选择的。
